浅部真菌病临床标本致病菌DNA提取方法的初步研究
Preliminary Study on Extracting DNA of Pathogenic Fungi From Clinical Specimens of Superficial Fungal Infection
目的初步建立直接从浅部真菌病临床标本中提取致病菌DNA的方法,为PCR技术快速诊断浅部真菌病及相关研究奠定基础.方法采用蛋白酶K消化法、煮沸法和冻融法处理直接镜检阳性的临床标本,以经典的酚-氯法抽提致病菌DNA,并用真菌通用引物ITS1进行PCR扩增检验.结果共收集标本61例,其中有44例PCR可扩增出特异性条带,甲屑的PCR检出率为81.0%,皮屑为69.2%;PCR检测为阴性的17例中有7例标本量较少,有5例菌量较少.整个DNA提取过程约需3h.结论本研究初步建立的直接从浅部真菌病临床标本中提取致病菌DNA的方法能满足后续PCR反应的需要;DNA提取效率与标本量和菌量有关.
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