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3-吲哚丙酸抑制腹膜间皮细胞EMT和纤维化的机制研究

Study on Mechanism of 3-indolepropionic Acid Inhibiting EMT and Fibrosis in Peritoneal Mesothelial Cells

摘要:

目的 评估3-吲哚丙酸(3-indoleacetic acid,IPA)对脂多糖(lipolyaccharide,LPS)诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)和纤维化的影响.方法 CCK-8法检测不同浓度(0.1、1.0和10μmol/L)的IPA对LPS处理前后的小鼠腹膜间皮细胞增殖活性的影响,确定IPA最佳使用剂量.将小鼠腹膜间皮细胞分成 Control 组、LPS 组、LPS+IPA 组、LPS+LY364947(TGF-β1/Smad3 通路抑制剂)组、LPS+IPA+LY364947 组和 LPS+IPA+SRI-011381(TGF-β1/Smad3通路激活剂)组;CCK-8法检测细胞增殖活力,Transwell法检测细胞侵袭,ELISA检测培养上清中间质表型α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的浓度,Western blot检测细胞中α-SMA,EMT相关因子E-cadherin,TGF-β1/Smad3通路相关因子Smad3、p-Smad3的蛋白表达.结果 IPA的最佳使用剂量为1.0 μmol/L.与Control组相比,LPS组细胞增殖活力、E-cadherin表达水平下降(均P<0.01),侵袭能力、α-SMA表达水平和p-Smad3/Smad3升高(均P<0.01).与LPS组相比,LPS+IPA组和LPS+LY364947组细胞增殖活力、E-cadherin表达水平上升(均P<0.01),侵袭能力、α-SMA 表达和 p-Smad3/Smad3 下降(均 P<0.01).与 LPS+IPA 组相比,LPS+IPA+LY364947 组所测指标趋势更加显著,LPS+IPA+SRI-011381组所测指标变化趋势均被逆转.结论 IPA通过抑制TGF-β1/Smad3通路中Smad3蛋白的磷酸化,从而抑制细胞EMT进展,减轻LPS诱导的腹膜间皮细胞损伤.

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作者: 李红波 [1] 涂璨 [1] 付帅 [1] 姜南 [1] 熊飞 [1]
分类号: R692.5
栏目名称: 论著
DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.23.09.014
发布时间: 2024-07-11
基金项目:
武汉市卫生健康委医学科研面上项目
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