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大白菜BrCYP83B1基因的克隆及表达分析

Cloning and Expression Analysis of BrCYP83B1 Gene in Chinese Cabbage

摘要:

[目的]细胞色素P450 家族是十字花科植物硫苷合成重要的酶系,其中CYP83 亚家族主要参与核心结构的合成,旨在探究大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)CYP83B1 基因的功能.[方法]利用RT-PCR技术克隆BrCYP83B1 基因,通过生物信息学软件分析其编码蛋白理化性质、同源性及启动子顺式作用元件,利用RT-qPCR技术分析BrCYP83B1 的表达模式,并构建其植物超表达载体.[结果]BrCYP83B1 cDNA序列全长为 1 500 bp,编码 499 个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450 超家族,主要定位于细胞质,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,与甘蓝型油菜、青花菜的CYP83B1 蛋白具有较高的同源性.启动子分析表明,该基因启动子区域包含水杨酸、脱落酸及茉莉酸甲酯等激素响应的顺式作用元件,说明BrCYP83B1 基因表达可能受激素调控.RT-qPCR分析结果表明,BrCYP83B1 基因在大白菜的根、茎、叶、花和果中均有表达,且以叶中的表达量最高;茉莉酸甲酯够显著促进该基因的表达,而水杨酸处理对其表达具有一定的抑制作用,脱落酸处理下基因先上调后又下调.[结论]BrCYP83B1可能参与大白菜对激素的响应调控.

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作者: 王玉书 [1] 赵琳琳 [1] 赵爽 [1] 胡琦 [1] 白慧霞 [1] 王欢 [2] 曹业萍 [1] 范震宇 [1]
期刊: 《生物技术通报》2024年40卷6期 152-160页 ISTICPKUCSCD
栏目名称: 研究报告
DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2023-1127
发布时间: 2024-07-03
基金项目:
国家自然科学基金 黑龙江省自然科学基金项目 黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目 黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目 黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目 黑龙江省普通高等学校青年创新人才培养计划项目 黑龙江省高等教育教学改革研究与实践项目
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