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目的 本研究旨在明确HBV DNA聚合酶是否与T淋巴细胞功能衰竭相关,进而介导HBV相关肝细胞癌(HCC)肿瘤细胞的免疫逃逸以及探寻具体的分子机制.方法 稳定转染带有Flag标签的HBV DNA聚合酶表达质粒(Flag-HBV-P)和细胞间黏附分子-1(ICAM1)的肝癌细胞系Huh7、HepG2与Jurkat细胞共培养,MTT、qRT-PCR、酶联免疫吸附测定(ELISA)实验分别检测Jurkat细胞增殖、活化(CD69表达)以及细胞因子IFN-γ分泌情况.RNA-seq筛选稳转细胞系与对照细胞中表达差异的免疫相关分子,mRNA半衰期及蛋白半衰期实验确定HBV DNA聚合酶对免疫相关分子具体在何种水平产生影响.网站预测此免疫相关分子启动子区域可能结合的转录因子,Western Blot实验验证转录因子对免疫相关分子的影响,挽救实验确定HBV DNA聚合酶是否通过此转录因子影响免疫相关分子的表达水平.两组间比较采用成组t检验.结果 与对照组相比,实验组细胞(Huh7、HepG2)增殖、活化及细胞因子分泌明显降低(P值均＜0.01).与对照细胞相比,实验组细胞(Huh7、HepG2)的ICAM1 mRNA和蛋白水平均降低(P值均＜0.01).网站预测ICAM1启动子并初步筛选锚定了NFKB1、RELA和STAT3.与对照组相比,实验组细胞(Huh7、HepG2)p65蛋白的表达水平明显降低(P值均＜0.01).过表达p65后,ICAM1蛋白表达水平明显升高,降表达p65后,ICAM1蛋白表达水平明显降低(P值均＜0.01),挽救实验中过表达p65后,对照组与实验组细胞的ICAM1表达水平无明显差异(P值均＞0.05).过表达ICAM1后,对照组与实验组细胞(Huh7、HepG2)的增殖、活化及细胞因子分泌无明显差异(P值均＞0.05).结论 HBV DNA聚合酶通过抑制NF-κB中p65的表达来下调ICAM1的水平以介导HCC免疫逃逸.