换一批
换一批microRNA-223-3p靶向微管相关蛋白1B抑制肝星状细胞活化的机制研究
Mechanism of microRNA-223-3p inhibiting hepatic stellate cell activation by targeting microtubule-associated protein 1B
摘要：
目的 探讨microRNA-223-3p(miR-223-3p)对肝星状细胞活化的影响及机制.方法 选取人肝星状细胞系LX2细胞为研究对象,采用TGF-β刺激LX2细胞的方式构建肝星状细胞活化模型,通过实时荧光定量PCR检测miR-223-3p在肝星状细胞活化过程中表达水平变化;转染miR-223-3p mimic至LX2细胞,通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹法(Western Blot)及细胞免疫荧光明确miR-223-3p对肝星状细胞活化的调控作用;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-223-3p与靶基因MAP1B的关系;转染MAP1B的siRNA至LX2细胞,通过Western Blot明确抑制MAP1B表达对肝星状细胞活化的影响;转染miR-223-3p至LX2细胞,通过实时荧光定量PCR和Western Blot验证miR-223-3p对MAP1B的调控作用.计量资料两组间比较采用成组t检验.结果 与静息状态相比,肝星状细胞处于活化状态时,miR-223-3p表达水平下降(t=9.12,P＜0.001).过表达miR-223-3p能抑制肝星状细胞活化标志物平滑肌肌动蛋白及Ⅰ型胶原的mRNA(t值分别为8.35、12.23,P值均＜0.01)和蛋白(t值分别为16.24、20.90,P值均＜0.001)表达水平.双荧光素酶报告基因实验证实MAP1B是miR-223-3p的潜在靶基因.与对照组相比,过表达miR-223-3p的LX2上MAP1B的mRNA表达(t=5.95,P＜0.01)及蛋白表达(t=11.12,P＜0.001)水平均显著降低.结论 miR-223-3p可通过靶向MAP1B抑制肝星状细胞活化.
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作者：
作者单位：
复旦大学附属华山manbet官网登录
感染科,上海市传染病与生物安全应急响应重点实验室,国家传染病医学中心,上海 200040
[1]
期刊：
《临床肝胆病杂志》2023年39卷12期 2845-2850页
ISTICPKU
关键词：
肝纤维化微管相关蛋白质类肝星状细胞微小RNAsHepatic FibrosisMicrotubule-Associated ProteinsHepatic Stellate CellsMicroRNAs
栏目名称：
肝纤维化及肝硬化
DOI：
10.3969/j.issn.1001-5256.2023.12.015
发布时间：
2023-12-22
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