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颌骨骨髓间充质干细胞成骨分化过程中线粒体功能变化的研究

Study on mitochondrial function changes during osteogenic differentiation of jaw bone marrow mesenchymal stem cells

摘要:

背景 线粒体对成骨分化起着关键调控作用,但颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)成骨分化过程中线粒体功能的变化尚不明确.目的 探究JBMMSCs成骨分化过程中线粒体功能的变化.方法 提取小鼠JBMMSCs进行培养并进行鉴定.采用第 3代JBMMSCs接种于孔板内,设置为对照组、成骨诱导 3d组、成骨诱导 7d组;检测ATP含量和柠檬酸合酶活性;RT-qPCR检测线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、NRF1、PGC-1α的mRNA表达;Western blot分析线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、FIS1、COXⅣ的蛋白表达;JC-1染色评估线粒体膜电位.结果 提取的JBMMSCs形态呈长梭形,具有三向分化潜能.与对照组相比,成骨诱导 7d时,ATP含量和柠檬酸合酶活性增加(P均<0.05);RT-qPCR结果表明,线粒体功能相关标志物MFN1、MFN2、NRF1、PGC-1α的mRNA表达上调(P<0.05);Western blot结果显示,MFN1、MFN2、FIS1、COXⅣ的蛋白表达上调(P均<0.05);JC-1染色结果证实,线粒体膜电位升高(P<0.05).结论 JBMMSCs成骨分化过程中线粒体功能相关标志物均表达上调,提示线粒体功能增强.

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