微小RNA-3619-5p通过靶向作用于p21基因对卵巢癌细胞生长的影响
Effect of MicroRNA-3619-5p on the Growth of Ovarian Cancer Cells by Targeting p21 Gene
目的:探讨微小RNA-3619-5p(miR-3619-5p)过表达对卵巢癌细胞系A2780和SKOV3中p21基因的上调作用及对卵巢癌细胞生长的影响.方法:使用Lipofectamine 3000分别向卵巢癌细胞系A2780和SKOV3瞬时转染miR-3619-5p(实验组)或者dsControl(对照组).通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测p21、细胞周期依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA的表达情况.蛋白质印迹(Western blotting)检测p21、CDK4和Cyclin D1蛋白的表达情况.流式细胞术检测对照组和实验组细胞周期分布差异和细胞凋亡情况.EdU增殖实验和集落形成实验检测细胞增殖能力.结果:与对照组相比,转染miR-3619-5p后2种细胞系中p21 mRNA均显著升高(P<0.01),而CDK4和Cyclin D1 mRNA的表达均明显降低(P<0.01).Western blotting实验结果与qRT-PCR结果一致.与对照组相比,转染miR-3619-5p后,位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降,位于G0/G1期的细胞比例明显增大,细胞凋亡率明显升高.EdU增殖实验和集落形成实验均显示,与对照组相比,转染miR-3619-5p的卵巢癌细胞的增殖能力明显下降(P<0.05).结论:miR-3619-5p可通过激活卵巢癌细胞中p21蛋白的表达抑制卵巢癌细胞的生长.
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